液氮罐短期储存胚胎的可行性研究的讨论

时间:2018-06-28 09:54来源: 作者:秩名 点击:

小鼠胚胎冷冻保存的成功,极大地推动了低温生物学的发展。胚胎冷冻保存现已成为实验动物保种的重要手段之一。实验动物胚胎库较活体保种有着经济又安全的优势。而通过胚胎引种因为快捷而廉价,使得国内外的胚胎运输也变得日益广泛。

气相液氮运输罐不同于传统的也相液氮罐,冻存的胚胎不直接接触液氮。它的罐壁内层有一层液氮层,液氮层吸附大量液氮,并向外排出液氮蒸汽来使罐内温度达到一188℃至一194℃。胚胎不接触液氮,能降低胚胎之间的交叉感染。同时操作时不会被液氮冻伤,增加了安全性。

液氮运输罐短期储存胚胎的可行性研究的讨论

本次实验中采用C57BL/6、B6D2、DBA/2、B10A4个小鼠品系,是因为其中既有近交系、同类系,也有杂交F1代。4个品系的冷冻胚胎在气象液氮运输罐存放14天的复苏率与保存在气相液氮罐的胚胎复苏率均无差异;C57BL/6、B6D2、DB舭这3个品系的出生率也无差异。结果中B10A小鼠的出生率的差异显著可能时因为本次实验的时间跨度较大。

从3月份一直持续到5月份,3月份放置气相液氮运输罐的室温为ll℃,5月份为18℃。环境温度可能会使气相液氮罐内的液氮蒸汽消耗过快,罐体内温度便会上升,而且环境温度还会在胚胎的转移过程中产生影响。

所以在尽量使放置气相液氮运输罐的环境保持比较低的温度,本实验胚胎在气相液氮罐存放时间zui长为14 d,因为本次实验考虑到国际运输所需时间较长,所以胚胎每次存放时间都使用了气相液氮运输罐保存时间的上限。另外胚胎每次存放的数量较少,因此胚胎都在罐体的底部,是整个罐体温度zui低的地方。

考虑到实际运用中的运输时间会有长短以及运输胚胎时数量较多时,一根冷冻管夹可能会放上4个冷冻管,所以胚胎就不一定都位于罐体的底部。有关胚胎在气相液氮运输罐不同保存时间以及不同存放高度的保存结果,有待进一步研究。