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液氮冻存细胞种在-80℃低温冷冻保藏
将菌种保存在-80℃冰箱中，以缓解细胞生理活动的冷冻。液氮罐制造商分享如下操作步骤：
先做好安瓿管的准备
安瓿管材料应为中性玻璃。清洗安瓿管时，用2%硫酸浸泡一夜。自来水冲洗干净后，用蒸馏水浸泡至pH中性。干燥后，贴上标签，标明菌号和时间。加入脱脂棉塞后，在121℃下进行高压灭菌(15℃)～20)min，备用。
如何利用液氮将菌种冷冻在-80℃
其次，要做好保护剂的选择准备
保护剂的类型应根据微生物的类型进行选择。制备保护剂时，应注意其浓度和pH值，以及灭菌方法。如血清，可过滤灭菌;牛奶应先脱油，用离心法去除上油，一般在100℃间歇煮2～3次，每次(10～30)min，备用。自增压液氮罐
今后，要注意微生物保存物的准备
在*适当的培养条件下，将细胞培养到静止期或成熟期，经过纯度检查，与保护剂搅拌均匀，分装。微生物培养物浓度应低于细胞或细胞(108-1010)个/ml(大肠杆菌)(Escherichiacoli)例如，为了获得每毫升1010个活细胞菌液2ml～2.5mL，只有两个10ml琼脂斜坡)。
选择较长的毛细滴管，直接滴入安瓿管底部，切记不要溅到上管壁上，每管装配量约(0.1～0.2)mL，如果是球形安瓿管，则装载量为半个球。如果是液体培养的微生物，应离心去除培养液，然后将培养物与保护剂混合，然后放入安瓿管中。安瓿管的分装时间应尽可能短，*幸运的是(1)～2)ml内分装并预冻。分装时应注意在无菌环境中操作。自增压液氮罐
然后进行冻结保存
将安瓿管或塑料冷冻管储存在-80℃的环境中。
我们还必须知道，如果我们想在冷藏后取出复苏方法。从冰箱中取出安瓿管或塑料冷冻管，应立即放置38℃～40℃水浴迅速恢复，适当快速摇晃。直到内部冻结完全溶解，约需50s～100s。打开安瓿管或塑料冷冻储存管，将内容物移至适当的培养液中进行培养。
